阿拉丁细胞裂解液选型与配制

? ? ? ?细胞裂解液是以去污剂为基础、针对细胞裂解应用、成分优化的缓冲液和试剂。对于不同细胞类型、蛋白定位、以及下游应用，需要不同的细胞裂解液进行有效的细胞裂解和蛋白提取。

去污剂主要类型及其作用

? ? ? ?根据去污剂类型、蛋白定位、及目的蛋白性质来确定细胞裂解液的种类。

去污剂主要类型及其作用

类型	带电情况	作用	应用	举例
离子型 (变性去污剂)	带电荷的阴离子性或阳离子性的	破坏蛋白活性、功能及蛋白间相互作用力	总蛋白提取 SDS-PAGE	SDS ETMAB
非离子型 (非变性去污剂)	不带电荷	较少破坏活性及功能，可维持蛋白间作用力	酶学检测免疫检测	Triton X-100 Tween 20 NP-40
两性离子型	具有正电荷和负电荷的基团但净电荷为零	兼具离子型和非离子型去污剂的特点，能破坏蛋白质间相互作用		CHAPS CHAPSO

根据蛋白定位不同推荐的裂解液种类

蛋白定位	全细胞	细胞质（可溶性蛋白）	细胞质（细胞骨架等不溶性蛋白）	细胞膜	细胞核	线粒体
裂解液种类	NP-40或RIPA	Tris-HCl	Tris-Triton	NP-40或RIPA	RIPA	RIPA

常用细胞裂解液

#RIPA缓冲液

? ? ? ?最初以其开发的测定方法(放射免疫沉淀测定法)来命名，是两种离子去污剂和一种非离子去污剂的Tris缓冲液,也是哺乳动物细胞或软组织裂解和蛋白提取的常用选择。

常用配方：

25 mM Tris-HCl, pH 7.6

150 mM NaCl

1% NP-40

1%去氧胆酸钠

0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)

兼容应用：

? ? ? ?BCA及去污剂兼容型的Bradford试剂蛋白浓度测定、SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹、ELISA及纯化等。

#IP缓冲液

? ? ? ?是一种修饰型的RIPA缓冲液（不含SDS），可有效溶解细胞蛋白，但无法释放基因组DNA或破坏蛋白复合物，可兼容下游的免疫沉淀或者亲和吸附的应用。

常用配方：

25 mM Tris-HCl, pH 7.4

150 mM NaCl

1% NP-40

1% mM EDTA

5% 甘油

兼容应用：

? ? ? ?BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀及报告基因检测。

#NP-40缓冲液

? ? ? ?NP-40是一种非离子型聚氧乙烯表面活性剂，常作为细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液的组分。

常用配方：

150mM NaCl

1.0% NP-40

50mM Tris-HCl，pH值8.0

兼容应用：

? ? ? ?BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。

#Tris-Triton缓冲液

? ? ? ?非离子型表面活性剂，常用作细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液。Trition X-100效果介于NP-40和SDS之间。

常用配方：

10mM 三羟甲基氨基甲烷(Tris)，pH值7.4

100mM NaCl

1mM EDTA

1mM EGTA

1% Triton X-100

10% 甘油

0.1% SDS

0.5% 去氧胆酸钠

兼容应用：

? ? ? ?BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。

产品列表

产品号	产品名称	规格	Cas	包装
C111538?	氯化钠	用于细胞和昆虫细胞培养,≥99.5%(T)	7647-14-5	500g,2.5kg
N105507	NP-40	~10% in H₂O	9016-45-9?	25ml,100ml, 500ml,5L
T109026?	Triton X-100	生化试剂级	9002-93-1	100ml,500ml,1L,4L
T105291	三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐(Tris HCl)	用于分子生物学和细胞培养,≥99.0%(AT)	1185-53-1	100g,500g
S104198	脱氧胆酸钠	98%	302-95-4	25g,100g, 250g,500g
S118591	十二烷基硫酸钠(SDS)	分子生物学级,≥98.5% (GC)	151-21-3?	25g,100g, 500g
T110602	三(羟甲基)氨基甲烷(Tris）	细胞培养级,≥99.9%(T)	77-86-1	5kg
E112489	乙二胺四乙酸(EDTA)	99%,用于细胞培养	60-00-4	100g,500g
E104434	3,6-二氧杂-1,8-辛二胺四乙酸（EGTA）	用于分子生物学,≥99.0%	67-42-5?	25g,100g, 500g
G118851	甘油	无菌,for molecular biology, ≥99%	56-81-5	100ml
R301899	RIPA裂解液（强）	-	-	100ml
R301900	RIPA裂解液（中）	-	-	100ml
R301901	RIPA裂解液（弱）	-	-	100ml