规格或纯度 | 40U/μl |
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英文名称 | RNase Inhibitor, Murine |
单位定义 | 1 个活性单位 (U) 是指抑制 5 ng RNase A 50 % 活性所需要的 RNase Inhibitor, Murine 的量。活性测定是通过抑制RNase A对胞苷2', 3'- 环一磷酸的水解来进行的。 |
储存温度 | -20°C储存 |
运输条件 | 超低温冰袋运输 |
产品介绍 |
产品简介 RNase Inhibitor, Murine 是利用大肠杆菌表达系统重组表达的鼠源 RNase 抑制剂,分子量为 50 KDa,可通过非竞争性方式按照 1:1 比例和 RNase A、B 和 C 特异性结合,并抑制这三种酶的活性。该反应是可逆的,通过尿素及巯基类试剂能够解离复合体,使抑制剂失活并使 RNase 复性。本品对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNase H 或来源于曲霉属的 RNase 无效。此外,RNase Inhibitor, Murine 与 Taq DNA 聚合酶,AMV 或 M-MLV 逆转录酶或噬菌体 RNA 聚合酶(SP6, T7 或 T3)一起使用时对聚合酶活性无抑制作用。 重组 RNase Inhibitor, Murine 氨基酸序列中不包含半胱氨酸。已证实,人源 RNase Inhibitor 序列中的半胱氨酸对氧化非常敏感并导致抑制剂失活。因此,RNase Inhibitor, Murine 与人 / 猪的 RNase 抑制剂相比,抗氧化能力显著提高,且在 DTT 浓度较低(1 mM)时更稳定。 这使其在不适宜高浓度 DTT 的反应中更具优势,如实时 RT-PCR。主要应用于: 1. 抑制常见真核 RNase; 2. 适用于 cDNA 合成和 RT-PCR; 3. 体外转录和翻译; 4. 酶催化的 RNA 标记反应; 5. 其他需要保证 RNA 完整性的实验。 活性定义 1 个活性单位 (U) 是指抑制 5 ng RNase A 50 % 活性所需要的 RNase Inhibitor, Murine 的量。活性测定是通过抑制RNase A对胞苷2', 3'- 环一磷酸的水解来进行的。 质量控制 1.蛋白纯度检测:SDS-PAGE 检测,蛋白纯度大于 99%。 2.核酸内切酶残留检测:将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37 温育 4 h,通过 DNA 电泳检测质粒无变化。 3.核酸外切酶残留检测:将酶液与双链 DNA 底物在 37℃ 温育 16 h,通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。 4.RNase 残留检测:将酶液与 RNA 底物在 37 温育 4 h,通过 RNA 电泳检测 RNA 底物无变化。 |