规格或纯度 | 5U/μL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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英文名称 | Hot Start Taq DNA Polymerase | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
单位定义 | 74℃,30 min,使 10 nmol dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为 1 个活性单位 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
储存温度 | -20°C储存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
运输条件 | 超低温冰袋运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品介绍 |
产品说明: Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration是一种适体基团修饰的耐热性TAQ DNA聚合酶,高温加热前,适体修饰基团与Taq酶结合,抑制聚合酶的活性,避免了引物延伸的非特异性扩增或引物二聚体的产生,增强了DNA扩增的特异性、灵敏度和稳定性,可广泛适用于常规PCR、多重PCR及巢式PCR等。经过95℃热激10min后,该酶即可恢复活性。此外 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration没有检测到3'→5'校对外切酶活性,但具有5'→3'外切酶活性,可用于荧光定量PCR的检测。Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration在常温下没有活性,便于PCR实验的常温操作。 ? 产品内容: 1.? Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration (10 U/μl ) 2.? 5×Hotstart Taq Buffer( Mg2? Plus) 3.? Solution I (10×) ? 活性定义:74℃,30 min,使 10 nmol dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为 1 个活性单位。 ? 使用方法: 1. PCR 反应体系的设置: a. 溶解并混匀 PCR 反应所需的各种溶液。并放置于冰浴上或冰盒内。建议反应 PCR 液体分装使用,避免反复冻融。 b. 参考下表设置 PCR 反应,建议 PCR 反应体系的配置在冰浴或在冰盒上进行: ※ 模板 DNA 用量:为了保证反应的灵敏性,25 μl 体系使用 10? 拷贝的靶序列作为模板,可参考下表计算需加入 PCR 体系的模板量。 1 μg 各种来源的 DNA 对应的摩尔数 ? ? 例如:纯化的人类基因组 DNA 浓度为 1 μg/μl,某基因在人类基因组中拷贝数为 10,其单位体积拷贝数为:? 3.0× 10? mol/μg × 1 μg/μl × 10 copy/mol 即:1/300 ul 浓度为 1 ug/μl 的人类基因组 DNA 中含 10? 拷贝该基因,稀释 300 倍后加 1μl 至 25 μl PCR 体系。为保证反应的特异性,DNA 终浓度应小于 10 ng/ul,过多的 DNA 可能会出现涂抹带甚至无特异性条带。 ? c. 用移液器轻轻吹打混匀或轻微 Vortex 混匀,室温离心数秒,使液体积聚于管底。 d. 各设置好的 PCR 反应管置于 PCR 仪上,开始 PCR 反应。 ? 2. PCR 反应参数的设置: 本产品是经过适体修饰型 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration,为了使 PCR 的扩增效率、定量精度等达到最佳,建议热激时间为 95℃ ,10 分钟
Product description: 3.0×?10??mol/μg × 1 μg/μl × 10 copy/mol 3. Product packaging:
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酶学委员会编号 | 2.7.7.7 |
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